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酶标仪的测定波长范围有单波长和双波长之分
加入时间：2012-07-26 08:53:52 当前新闻点击率：5136
酶标仪的法测定可见光光的激发光谱规模有单可见光光的激发光谱和双可见光光的激发光谱之分，基本主要内容以下：
一般酶标仪的医疗器械测定波长在400～750nm或800nm之间，完全可以满足ELISA的显色测定。目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP)，底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD)，其在过氧化氢溶液的存在下，经HRP作用，分别氧化为2，2，—二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。当pH值为5．0左右时，DAB在450nm波长处有最大吸收，当pH值降为L 0时，最大吸收波长移至492 nm，同时摩尔消光系数变大，显色加深，因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有最大消光系数，如果HRP量少，H：O：和TMB过量时，则形成蓝色的阳离子根。降低pH，即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌，使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min。
因此，450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定最常用的。各种医疗设备酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件，可以同时安装6～8片滤光片，所配备的滤光片均应包括上述两个波长，有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片，影响不大。除了这两个基本滤光片外，考虑到双波长比色的需要，还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片，其他滤光片可根据自己的需要选择。有时，有的实验室希望用酶标仪作微量生化测定，故酶标仪生产厂家对其生产的酶标仪扩展了紫外检测功能，此时需要一个340 nm波长滤光片。此时，酶标仪的测定波长范围就成为340—750nm或800nm。
酶标仪的治疗设施设备有单光波可见光主主光激发光谱和双光波可见光主主光激发光谱检侧实用功能。一会儿运行者殊不知在这些事情下运行单或双光波可见光主主光激发光谱检侧。其实的“单光波可见光主主光激发光谱”也是运行另一种对显色具极大的代谢能力的光波可见光主主光激发光谱即450 nm或492 nm开展比色测得；而“双光波可见光主主光激发光谱”则不仅用对显色具极大的代谢能力的光波可见光主主光激发光谱即450 nm或492 nm开展比色测得外，此外用对特异显色不神经敏感的光波可见光主主光激发光谱如630 nm开展测得，酶标仪结果彩打完成的吸光度则为二者之间之差。630 nm光波可见光主主光激发光谱下得了到的吸光度是非要特异的，发源于板孔上诸如此类指纹图、污垢、脏物等可致的代谢能力。故而，在ELISA比色测得中，较好运行双光波可见光主主光激发光谱，且并不设空白的孔。 上一篇:
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