如何设置全自动生化分析仪的参数
加入时间:2012-01-09 09:55:52 当前新闻点击率:32767
由医疗器械公司研发并生产的全自动生化分析仪常见的分析方法有:终点分析法、连续监测法、比浊测定法。
1.1 终点分析法
1.1.1 一点终点法
该法的特殊性是选择那种或多种制剂,待旋光度的判断物与制剂反馈可达起点终点时,旋光度的判断吸光度,换算待测物的氨水浓度。该法种类的有总血清双缩脲法、白血清溴甲酚绿法、提子糖钝化酶法。
1.1.2 两点终点法
也称固定时间法。在单试剂分析中,该法可以消除样品以及试剂的颜色、浊度的干扰,其原理是在样品与试剂混合后的延滞期后读取一个点A1,一定时间后读取A2,ΔA=A2-A1,然后比较标准和测定的ΔA值,求得待测物的浓度。单试剂分析常见的有肌酐苦味酸法。在双试剂分析中,该法还具有消除内源性物质测定的干扰,其原理是加入试剂1后读取A1,加入试剂2后读取A2,A1相当于读出样品空白值,A2才是实际呈色反应,因此ΔA=A2-A1。
1.2 连续监测法
其操作过程是在酶促不良的反應的最适先决条件下,用物理上的、生物学或酶促不良的反應的研究分析方式办法,在不良的反應日期稳态期(零级不良的反應期)来维持洞察分析和记录日期一些不良的反應日期内底物或乙酰乙酸量的变化无常,以院校日期酶不良的反應初日期运算出酶精力的多少和基础代谢物的渗透压。其详细方式办法有2点时延法和多一些时延法。
1.2.1 两点速率法
观察在零级反应期内两个时间点的吸光度,用两个点的吸光度的差值(ΔA)除以时间(分),计算出每分钟的吸光度变化值。
1.2.2 多点速率法
在酶促反应进程的零级反应期内每隔一定时间(2-30s)进行一次监测,连续监测多次,求出单位时间内的反应速度。
1.3 比浊测定法
自动化生化分析仪一般只能做透射比浊分析,其原理是在光源的光路方向测量透过光强度,它常用于终点法测定,目前应用较多的为免疫透射比浊法。目前主要用于血清特种蛋白的检测,如载脂蛋白、微量蛋白、急性时相反应蛋白、免疫球蛋白以及某些药物监测等。
2. 温度
一般生化分析仪的恒温控制器可以对25℃、30℃、37℃三种温度进行恒温,根据需要可以任意选择。由于酶在达到最适温度以前,温度每升高10℃,反应速率增加1-2倍,因此IFCC推荐酶测定时的温度设置为37℃。
3.波长
3.1 单波长
当旋光度的测定指标体系中含还有其中个种多类成分或在交织饱和溶液中待测多类成分的吸引的作用峰与另其中个相融成分的吸引的作用光谱无交叠时,自选用。如果其中个成分有四个吸引的作用峰,自选用吸光度最高的其中个光谱,并且使用在吸引的作用峰处吸光度随光谱转变 较少的许多 光谱。
3.2 双波长
当被检溶液混浊或存在较多的干扰物质时,测定时会出现光散射和非特异性光吸收,从而影响测定结果的准确性,此时可用双波长测定,以提高测定结果的准确性,而在实际应用中选择辅助波长主要用于消除脂血、溶血、黄疸的干扰。由于脂质、血红蛋白、胆红素在较宽的波长范围内有较强的光吸收,常常同测定波长有重叠,此时测得的吸光度包含待测物质的吸光度和干扰物质的吸光度,因此选用合适的辅助波长可以消除干扰物质的吸光度。辅助波长的设置原则是根据测定波长选择辅助波长,要求干扰物质在测定波长同辅助波长有相同的吸光度。
4. 样品量和试剂量
样品和试剂量的设置原则一般是根据试剂说明书上的比例,并结合仪器的特性进行设置。仪器的特性包括:样品和试剂的最小加样量及加量范围、最小反应液的体积等。在实际工作中为节约成本可以根据比例缩小样品和试剂用量,但同时必须满足最小反应液总量。但值得注意的是,样品量不应少于3μl,否则测试结果的重复性差。