华体会在线平台


电话
400 696 6267
DNA测序原理和方法
加入时间:2014-03-03 16:09:18  当前新闻点击率:2987

    DNA测序就是项广泛应用技术应用于品质体检报告、临产前初步判断等教育领域的技术应用,影星安吉丽娜·朱莉苹果公司创始人史蒂夫·乔布斯都曾得到过DNA测序,而前很快多台委却喊停人类基因测序相应系统及品牌,这一种新举措产生了大面积的生活喜爱。并且还有众多人对DNA测序原理和方法全都不太了解,因此让我们请北京普东兴系统咨询师陆主管为亲们解答释疑。

 

    DNA测序方法有越来越多种,如Sanger双脱氧链终止法、电学化学降解法、系统工控设备测序法一系列。

 

    Sanger双脱氧链终止法作用:测序过程需要先做一个聚合酶连锁反应(PCR)。PCR过程中,双脱氧核糖核苷酸可能随机的被加入到正在合成中的DNA片段里。由于双脱氧核糖核苷酸多脱了一个氧原子,一旦它被加入到DNA链上,这个DNA链就不能继续增加长度。最终的结果是获得所有可能获得的、不同长度的DNA片段。目前最普遍最先进的方法,是将双脱氧核糖核苷酸进行不同荧光标记。将PCR反应获得的总DNA通过毛细管电泳分离,跑到最末端的DNA就可以在激光的作用下发出荧光。由于ddATP,ddGTP,ddCTP,ddTTP荧光标记不同,计算机可以自动根据颜色判断该位置上碱基究竟是ATGC中的哪一个。

 

    化学修饰法测序原理将一个DNA片段的5'端磷酸基作放射性标记,再分别采用不同的化学方法修饰和裂解特定碱基,从而产生一系列长度不一而5'端被标记的DNA片段,这些以特定碱基结尾的片段群通过凝胶电泳分离,再经放射线自显影,确定各片段末端碱基,从而得出目的DNA的碱基序列。

 

    自动化测序法原理图:与链撤销法测序作用雷同,只是用不同的荧光色彩标记ddNTPddATP标记红色荧光ddCTP标记蓝色荧光ddGTP标记黄色荧光ddTTP标记绿色荧光.由于每种ddNTP带有各自特定的荧光颜色而简化为由1个泳道同时判读4种碱基.